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Favorgen FASOI 001-1說(shuō)明書(shū)

更新時(shí)間:2018-10-10      點(diǎn)擊次數(shù):2333

 

 

Favorgen FASOI 001-1說(shuō)明書(shū)

Favorgen位于中國(guó)臺(tái)灣國(guó)家生物技術(shù)園區(qū)。它通過(guò)自動(dòng)化系統(tǒng)建立了ISO合格工廠,
生產(chǎn)高質(zhì)量的分子生物學(xué)產(chǎn)品和臨床化學(xué)試劑。目前,F(xiàn)avorgen在美國(guó),中國(guó),韓國(guó)和丹麥設(shè)立分支機(jī)構(gòu),并在30多個(gè)國(guó)家設(shè)立了分銷網(wǎng)絡(luò)。自成立以來(lái),F(xiàn)avorgen已經(jīng)在其先進(jìn)的生產(chǎn)設(shè)施上投入了大量資金,以競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格為客戶提供高質(zhì)量的產(chǎn)品。Favorgen致力于通過(guò)與學(xué)術(shù)和行業(yè)合作伙伴的內(nèi)部和合作開(kāi)展研究,以不斷提供高質(zhì)量的創(chuàng)新產(chǎn)品。

 

 

核酸提取土壤DNA分離迷你試劑盒

Nucleic-acids extraction Soil DNA Isolation Mini Kit

核酸提取土壤DNA小試劑盒

FavorPrepTM  Soil DNA Isolation Mini Kit

Favorgen FASOI 001-1說(shuō)明書(shū)

Cat.No. : FASOI 000, 4 preps

FASOI 001, 50 Preps

FASOI 001-1, 100 Preps

(For Research Use Only)

 

FASOI 000

(4 preps_sample)

FASOI 001

(50 preps)

FASOI 001-1

(100 preps)

 

 

Glass Beads

1 g

12 g

25 g

SDE1 Buffer

3.6 ml

40 ml

70 ml

SDE2 Buffer

1.2 ml

15 ml

25 ml

SDE3 Buffer

1.2 ml

15 ml

30 ml

SDE4 Buffer

1.5 ml

25 ml

40 ml

Wash Buffer (concentrate) *

1.5 ml

20 ml

40 ml

Elution Buffer

1.5 ml

25ml

50 ml

SDE Mini Column

4 pcs

50 pcs

100 pcs

Collection Tube

8 pcs

100 pcs

200 pcs

Elution Tube

4 pcs

50 pcs

100 pcs

Bead tube

4 pcs

50 pcs

100 pcs

User Manual

1

1

1

 

* Preparation of Wash Buffer for first use:

Cat. No:

FASOI 000

FASOI 001

FASOI 001-1

ethanol volume for Wash Buffer

6 ml

80 ml

160 ml

 

規(guī)格:

 

原理:自旋柱(硅膠膜)樣品:0.25~0.5g

 

手術(shù)時(shí)間:<60分鐘排氣量:50~200毫升

重要說(shuō)明:

 

本系統(tǒng)中提供的緩沖區(qū)包含刺激物。在處理這些緩沖器時(shí),戴上手套和實(shí)驗(yàn)室外套。

 

使用前檢查SDE 1緩沖液,如有沉淀,應(yīng)在60℃溫10分鐘。

 

使用前,在洗滌緩沖液中加入適量乙醇(96%-100%)。

 

準(zhǔn)備加熱塊或水浴至70°C。如果從革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌中分離出DNA,則準(zhǔn)備加熱塊或水浴至95°C進(jìn)行另一次培養(yǎng)。

 

所有的離心步驟都是在微型離心機(jī)中全速進(jìn)行的(~18,000 x g)。

 

預(yù)熱洗脫緩沖液或ddH2O至60°C為洗脫步驟。

 

 

“一般性議定書(shū)”:

 

在開(kāi)始以下步驟之前,請(qǐng)閱讀重要說(shuō)明。

 

加入200毫克玻璃珠到2.0毫升珠管(提供)。將0.25~0.5g的土樣移入珠管,然后放置在冰上。

 

-如果樣品是液體的,在2.0毫升的珠管中加入200毫升的樣品。

 

在樣品中加入600升SDE 1緩沖器,以大速度旋轉(zhuǎn)5分鐘。將樣品在70℃下孵育10 min,在孵育過(guò)程中旋轉(zhuǎn)兩次。

 

-從革蘭陽(yáng)性桿菌中分離DNA,在95℃下進(jìn)一步孵育5分鐘。

 

簡(jiǎn)單地旋轉(zhuǎn)管子,以去除從蓋子內(nèi)部滴下來(lái)。

 

冷卻樣品混合物,加入200升SDE2緩沖液。通過(guò)渦旋使混合均勻。將樣品在冰上孵育5分鐘。

 

全速離心(~18,000×g)5分鐘。

 

仔細(xì)地將澄清的上清液轉(zhuǎn)移到1.5毫升的微離心管(未提供)。測(cè)量上清液的體積。

 

-避免將任何碎片和彈丸打穿。

 

加入1體積異丙醇和渦旋混合均勻,全速離心10 min,使DNA顆粒化。

 

-例如:如果澄清的溶解液體積為450升,則在澄清的裂解液中加入450升異丙醇。

 

小心丟棄上清液,在紙巾上倒置管1分鐘,去除殘留液體。

 

-不要打亂佩爾號(hào)

 

加入200升預(yù)加熱排放緩沖液或ddH2O,旋渦使DNA顆粒*溶解。

 

在樣品中加入100升SDE 3緩沖器,通過(guò)渦旋將其混合均勻。將樣品在室溫下孵育3分鐘。

 

-注:SDE 3緩沖器必須在每次使用前,通過(guò)大力vrotexing*暫停。

 

-切斷1毫升針尖的末端,使SDE 3緩沖器的插入更容易。

 

 

v 0515

 

全速離心2分鐘。

 

小心地將上清液轉(zhuǎn)移到1.5毫升的微離心機(jī)上(未提供)。測(cè)量上清液的體積。

 

-避免將任何碎片和彈丸打穿。

 

(可選)如果需要無(wú)RNA的DNA,加入1升100毫克/毫升的RNase A(不提供)到樣品中,混合好。室溫培養(yǎng)2 min。

 

簡(jiǎn)單地旋轉(zhuǎn)管子,以去除從蓋子內(nèi)部滴下來(lái)。

 

加入1份SDE 4緩沖液和1份乙醇(96%~100%)。通過(guò)脈沖旋渦充分混合.

 

例如:當(dāng)澄清液體積為250 l時(shí),加入250升SDE 4緩沖液和250升乙醇(96%~100%)。

 

將SDE柱放入收集管中,并將所有樣品混合物轉(zhuǎn)移到SDE柱。全速離心1分鐘,然后丟棄流過(guò),然后將sde柱放入ne中。 W收集管。

 

加入750升洗滌緩沖液(乙醇添加)到SDE柱。全速離心1分鐘,然后丟棄流道.

 

-確保在次使用時(shí)將乙醇(96%~100%)加入到洗滌緩沖液中。

 

重復(fù)第17步。

 

全速離心3分鐘,干燥SDE柱。

 

-重要的一步!這一步將避免殘留液體抑制后續(xù)的酶反應(yīng)。

 

將SDE柱放入1.5毫升的微離心管(未提供)。在SDE塔膜中心加入50~200μl預(yù)熱排液緩沖液或ddH2O。將SDE柱放置2分鐘 室溫。

 

-重要的一步!為了進(jìn)行有效的洗脫,確保洗脫緩沖液或ddH2O被分配到膜中心并被*吸收。

 

全速離心1 min以逃避DNA。

 

發(fā)現(xiàn)并修理故障,解決紛爭(zhēng)

 

問(wèn)題

可能的原因

解答

基因組DNA的低產(chǎn)率或無(wú)產(chǎn)率

 

樣本存儲(chǔ)不當(dāng)

糞便樣本存放在-20°C。

樣本中細(xì)胞數(shù)量少

增加樣本量

不良細(xì)胞溶解

細(xì)胞溶解能力差,因?yàn)榇蛑椴粔?/span> time

延長(zhǎng)珠子打漿時(shí)間。

DNA與柱膜結(jié)合不足

在dna結(jié)合之前,沒(méi)有在樣品中加入乙醇。

確保在DNA結(jié)合之前,在樣品中加入一定量的乙醇(96%-100%)。

乙醇和樣品裂解液在DNA結(jié)合之前沒(méi)有很好的混合。

確保乙醇和樣品裂解液在dna結(jié)合之前已*混合。

W1/W2洗滌緩沖液制備不當(dāng)

次使用時(shí)不加乙醇。

次使用時(shí)不加乙醇。

在洗滌緩沖液中加入乙醇的體積或百分比是不正確的。

次使用時(shí),一定要將適量的乙醇(96%-100%)加入到洗滌緩沖液中。

DNA洗脫無(wú)效。

洗脫用水(DdH2O)的pH是酸性的。

確保ddH2O的pH值在7.0-8.5之間。

使用洗脫緩沖液(提供)進(jìn)行洗脫。.

洗脫緩沖液或ddH2O不能被柱膜*吸收。

加入萃取緩沖液或ddH2O后,在離心前將SD柱放置5 min。

基因組DNA質(zhì)量差

A 260/A 280

 

洗脫DNA率低

不良細(xì)胞溶解

細(xì)胞溶解能力差,因?yàn)榇蛑闀r(shí)間不夠

延長(zhǎng)珠子打漿時(shí)間。

A 260/A 280

 

洗脫DNA率高

洗脫DNA中的大量殘留RNA

在洗脫液中加入8升RNase A(50 mg/ml),37℃孵育10 min。孵育后,加入200升SD2緩沖液和200升乙醇(96%~100%),混合均勻。

 

-渦旋。然后從第7步開(kāi)始遵循“一般協(xié)議”。

 

 

FASOI 000

FavorPrep™土壤DNA分離迷你試劑盒

4個(gè)準(zhǔn)備。

Glass Beads 
SDE1 Buffer 
SDE2 Buffer 
SDE3 Buffer 
SDE4 Buffer 
Wash Buffer 
Elution Buffer 
SDE Mini Column 
2 ml Collection tube Elution Tube 
Bead tube

在室溫(15~25℃)下保存2年。

FASOI 001

50個(gè)準(zhǔn)備。

FASOI 001-1

100個(gè)準(zhǔn)備。

FASOI 002

FavorPrep™土壤DNA分離Midi試劑盒

24個(gè)準(zhǔn)備。

Glass Beads 
SDE1 Buffer 
SDE2 Buffer 
SDE3 Buffer 
SDE4 Buffer 
Wash Buffer 
Elution Buffer 
SDE Midi Column 
50 ml Elution Tube

在室溫(15~25℃)下保存2年。

 

 

 

 

 

上海起發(fā)是實(shí)驗(yàn)試劑一站式采購(gòu)服務(wù)商

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